Rola centralnych adrenoceptorów alfa-1 w narkolepsji psów.

Rola centralnych receptorów adrenergicznych alfa-1 w katapleksji została zbadana u genetycznie narkoleptycznych pinczerów Dobermana. Leczenie narkoleptycznych psów za pomocą 25-600 mikrogramów / kg prazosyny, selektywnego blokera receptora alfa-1 adrenergicznego, zaostrzało katapleksję, podczas gdy leczenie agonistą alfa-1, metoksaminą, łagodziło go. Kolejne badania wykazały, że korzystny wpływ klasycznego leczenia narkolepsji u ludzi (amfetaminy i trójcykliczne leki przeciwdepresyjne) jest antagonizowany przez prazosin, co sugeruje, że leki te są aktywne poprzez pośredni...

Zwiększona sztywność lewej komory upośledza napełnianie psów rozedmą płuc w niewydolności oddechowej.

W przewlekłym psim modelu rozedmy płuc, badaliśmy interakcje między mechaniką lewej komory (LV) a chorobą płuc podczas ciężkiej hipoksemii. Hipoksemia była podobna do tej, która może wystąpić podczas ciężkiego zaostrzenia przewlekłej obturacyjnej choroby płuc. U sześciu psów z rozedmą płuc wywołaną przez papainę i siedmioma psami bez rozedmy płuc, mechanizmy LV zbadano, gdy zainspirowano mieszaninę hipoksycznych gazów do obniżenia PO2 do około 35 mm Hg (badanie niedotlenienia) i w warunkach nietypowych (badanie powietrza w pomieszczeniu). W obu grupach podatno...

Hemoglobiny McKees Rocks (alpha2beta2145Tyr prowadzi do Term). Ludzka "nonsensowna" mutacja prowadząca do skróconego łańcucha beta.

Pierwszym przykładem przedwczesnego zakończenia łańcucha polipeptydowego u człowieka wydają się być Hb McKees Rocks, a beta145 Tyr prowadzi do Term, odkrytego u policystycznych członków rasy kaukaskiej. Mutacja punktowa najwyraźniej wystąpiła w kodonie dla Tyr beta145 z UAU do kodonu "nonsensownego", UAA lub UAG, skutkując skróconym łańcuchem polipeptydowym z Lys 144 jako jego aminokwasem na końcu karboksylowym. Dowodem tego strukturalnego wniosku jest brak peptydu tryptycznego betaT-15 z "odcisków palców" nieprawidłowego łańcucha beta, odkrycie C-...

Wadliwe przetwarzanie prekursora insuliny-receptora w hodowlanych limfocytach od pacjenta z ekstremalną opornością na insulinę.

Zbadaliśmy pacjenta z ekstremalną opornością na insulinę, rogowaceniem nerek i zmniejszoną insulinowiążącą erytrocytem. Transformowane EBV limfocyty od tego pacjenta wykazywały znacząco zmniejszone wiązanie insuliny 125I. Radioaktywacja receptorów powierzchniowych komórek, a następnie immunoprecypitacja przeciwciałami antyreceptorowymi ujawniła obecność zwiększonych ilości białka 210 kD, ale nie wykryto podjednostek alfa lub beta. Ciągłe znakowanie 2- [3H] mannozą ujawniło syntezę prekursora 190 kDa i białka 210 kD. Białko o masie 210 kD było fosforylowane w s...

Najnowsze zdjęcia w galerii menadzerzuzlowy:

Autoprzeciwciał przeciw kamieniowi nazębnemu w miejscach zakotwiczenia mikrofilamentu rozpoznaje nowe, ogniskowe białka kontaktowe.

Mikrofilamenty aktyny zakotwiczone są w błonie plazmatycznej przy kontaktach ogniskowych. Stosując metodę pośredniej immunofluorescencji, wykryliśmy autoprzeciwciała reaktywne z kontaktami ogniskowymi w komórkach PtK2, HEp-2 i BHK-21 w surowicy od dwóch pacjentów z wczesnym twardziną układową. Przy podwójnej immunofluorescencji, stosując środek wiążący aktynę falloidynę, zlokalizowaliśmy płytki dekorowane przez te surowice, szczególnie na końcach wiązek mikrofilamentów. Reaktywne antygeny zidentyfikowano przez immunoblotting jako białka o masie cząsteczkowej 80 ...

Kultura in vitro komórek eksfoliowanych w moczu przez pacjentów z cukrzycą.

Jako podejście ułatwiające zrozumienie postępu cukrzycowej choroby nerek, ocenialiśmy mocz chorych na cukrzycę i normalnych ochotników na obecność komórek, które można hodować in vitro. Wyniki sugerują, że zarówno normalna grupa kontrolna jak i pacjenci z cukrzycą, bez klinicznie wykrywalnej mikroangiopatii, złuszczają kilka komórek w moczu. W przeciwieństwie do tego, chorzy na cukrzycę z udokumentowaną retinopatią, ale bez nefropatii złuszczają znacznie większą liczbę komórek zdolnych do hodowli (5,2 komórek / 100 ml moczu), podczas gdy osoby z cukrzycą zar...

Niewrażliwość na komórki B w szczurzym modelu cukrzycy insulinoniezależnej. Dowód na szybko odwracalny wpływ wcześniejszej hiperglikemii.

W perfundowanej trzustce u szczurów, u których stwierdzono cukrzycę po zastrzyku streptozotocyny (STZ) w wieku noworodkowym, odpowiedź insulinowa na 27 mM glukozy była znaczna, ale upośledzona. Na jego działanie nie wpływał alfa adrenergiczny bloker fentolaminy. Gdy dodano 27 mM mannoheptulozy jednocześnie z 27 mM glukozy, uwalnianie insuliny było zahamowane, ale mniej szybko niż w trzustkach szczurów bez cukrzycy. Po wprowadzeniu mannoheptulozy 15 minut po rozpoczęciu perfuzji z 27 mM glukozy, hamowanie było widoczne u szczurów bez cukrzycy, ale nie w STZ. U szczurów bez c...

Angioplastyka balonowa wzmacnia ekspresję receptorów angiotensyny II AT1 w neointimy aorty szczura.

Angiotensyna II jest wazoaktywnym peptydem i może działać jako czynnik wzrostu w komórkach mięśni gładkich naczyń. Eksperymentalne uszkodzenie aorty szczura powoduje szybką migrację przyśrodkowych komórek mięśni gładkich i ich proliferację, co powoduje tworzenie się nowych błon wewnętrznych. Zbadaliśmy, stosując autoradiografię ilościową, ekspresję podtypów receptora angiotensyny II AT1 i AT2 oraz enzymu konwertującego angiotensynę w neointimy powstałej w aorcie piersiowej szczura 15 dni po urazie balonu-cewnika. W przeciwieństwie do normalnej ściany aorty, kt...

Wpływ transportu anionów organicznych Cl w krótkookresowych hodowlach hepatocytów szczura i izolowanej perfuzji wątroby szczura.

Transport sulfobromoftaleiny znakowanej 35S [35S] BSP badano w krótkoterminowych hodowanych hepatocytach szczurzych inkubowanych w albuminie surowicy bydlęcej. W temperaturze 37 stopni C początkowy pobór [35S] BSP był 5-10-krotnie większy niż w 4 ° C, liniowy przez co najmniej 15 minut, nasycalny, hamowany przez bilirubinę i zmniejszony o więcej niż 70% po wyczerpaniu ATP lub substytucji izosmotycznej. sacharozy dla NaCl w pożywce. Zastąpienie Na + przez K + lub Li + nie zmieniło wychwytu, podczas gdy zastąpienie Cl- przez HCO-3 lub glukonianem zmniejszyło pobór o około 40...

Autoprzeciwciała LKM-1 rozpoznają krótką sekwencję liniową w P450IID6, monooksygenazę cytochromu P-450.

Autoprzeciwciała LKM-1, które są związane z autoimmunizacyjnym przewlekłym aktywnym zapaleniem wątroby, rozpoznają P450IID6, monooksygenazę cytochromu P-450. Reaktywności 26 antysurowiców LKM-1 badano za pomocą panelu mutantów delecyjnych P450IID6 wyrażonych w Escherichia coli. 22 surowice rozpoznają 33-aminokwasowy segment P450IID6, a 11 z nich rozpoznaje krótszy segment DPAQPPRD. PAQPPR znajduje się także w IE175 wirusa opryszczki pospolitej typu 1 (HSV-1). Przeciwciała dla białek HSV-1 wykrywano testem ELISA w 17 z 20 testowanych surowic LKM-1. Do oczyszczenia przeciwc...

Biosyntetyczne i strukturalne badania białek o ciężkim łańcuchu

Nowe białko o ciężkim łańcuchu (? HCD-JM) zostało scharakteryzowane za pomocą kryteriów antygenowych i strukturalnych. Białko należy do podklasy IgG3 i jest blisko spokrewnione z fragmentem Fc immunoglobulin G3. Dominującym N-końcowym aminokwasem tego białka jest kwas glutaminowy w postaci niecyklizowanej, a inny? HCD jest glicyną. Badania N-końcowych peptydów wskazują, że N-końcowa część łańcucha ciężkiego polipeptydu A3 jest nieobecna w JHCD-JM. Wyniki te wykluczają proces normalnej inicjacji ciężkiego łańcucha i dużą delecję regionu Fd jako odpowiedzialn...

Białko C zapobiega koagulopatycznemu i letalnemu wpływowi infuzji Escherichia coli u pawiana.

Gram-ujemna posocznica wywołuje wiele nieprawidłowości układu krzepnięcia. Chociaż produkty krzepnięcia mogą prowadzić do tworzenia skrzepów, co potęguje uszkodzenie narządów, ostatnie badania wykazały, że niskie stężenia trombiny mogą chronić zwierzęta przed wstrząsem. Ponieważ te ilości trombiny również prowadzą do powstania in vivo enzymu antykoagulującego, aktywowanego białka C, zbadaliśmy rolę białka C w modulacji szoku Escherichia coli u pawianów. Najpierw dodaliśmy aktywowane białko C i letalne stężenia organizmów E. coli, które zapobiegły koagu...

Utlenianie określonej metioniny w trombomodulinie przez aktywowane produkty neutrofili blokuje aktywność kofaktora. Potencjalny szybki mechanizm modulacji krzepnięcia.

Trombomodulina śródbłonka (TM) odgrywa kluczową rolę w hemostazie jako kofaktor do zależnego od trombiny tworzenia aktywowanego białka C, silnego antykoagulanta. Chloramina T, H2O2 lub kwas podchlorynowy wytworzony z H2O2 przez mieloperoksydazę szybko niszczą 75-90% aktywności kofaktora TM. Aktywowany PMN, pierwotne źródło biologicznych utleniaczy in vivo, również szybko dezaktywuje TM. Utlenianie TM przez PMN jest hamowane przez difenylenodjodon, inhibitor oksydazy NADPH. Zarówno Met291 jak i Met388 w sześciu domenach powtórzeń typu naskórkowego podobnego do czynnika wz...

Kompleks końcowy dopełniacza C5b-9 stymuluje mitogenezę w komórkach 3T3.

Kompleks dopełniacza błony (MAC) może indukować odwracalne zmiany w przepuszczalności błony komórkowej, powodując znaczące, lecz przejściowe wewnątrzkomórkowe zmiany jonowe przy braku lizy komórek. Ponieważ strumienie jonów i cytosolowe zmiany jonowe są integralnymi etapami kaskady sygnalizacyjnej zapoczątkowanej, gdy czynniki wzrostu wiążą się z ich receptorami, postawiliśmy hipotezę, że indukowane przez MAC odwracalne zmiany przepuszczalności błony mogą stymulować proliferację komórek. Używając oczyszczonych końcowych składników dopełniacza udokumentowa...

Czynnik stymulujący kolonię granulocytów i makrofagów indukuje wydzielanie cytokin przez ludzkie leukocyty wielojądrowe.

Czynnik stymulujący kolonię granulocytów i makrofagów (GM-CSF) jest znany jako induktor proliferacji i aktywacji funkcjonalnej komórek mieloidalnych. Badanie to zostało przeprowadzone w celu dokładniejszego scharakteryzowania wpływu GM-CSF na leukocyty wielojądrzastkowe (PMN). Korzystając z analizy Northern blot, pokazujemy, że PMN są zdolne do akumulowania mRNA dla różnych cytokin, w tym czynnika martwicy nowotworów-alfa (TNF-alfa); G-CSF i M-CSF, z których wszystkie są zaangażowane w zapalenie i hematopoezę. Testy biologiczne i testy immunologiczne wykazują, że PMN t...

Naturalne autoprzeciwciała mysie i konwencjonalne przeciwciała wykazują podobne poziomy antygenowej reaktywności krzyżowej.

Komórki B śledziony od myszy normalnych i autoimmunologicznych przenoszono do biorców xid kompatybilnych z MHC. Przeciwciała monoklonalne były wydzielane przez przeniesione komórki B w hodowlach fragmentów śledziony. Przeciwciała te oceniano pod kątem reaktywności i reaktywności krzyżowej wobec panelu sześciu autoantygenów i dwóch konwencjonalnych antygenów przy użyciu testu ELISA. Autoprzeciwciała i konwencjonalne przeciwciała wytwarzane w hodowlach fragmentów śledziony przez normalne DBA / 2 i autoimmunologiczne komórki NZB B wykazywały podobne stopnie antygenowej ...

Specyficzne wiązanie antygenu z ludzkimi limfocytami T.

Wykazano, że ludzkie limfocyty T uczulone na Candida albicans (CA) proliferują w hodowlach indukowanych mannanem, rozgałęzionym polisacharydem ekstrahowanym ze studzienki komórkowej CA. Obecnie opisujemy, że gdy używano silnie znakowanego [3H] mannanu, specyficzne dla antygenu komórki T były zdolne do wiązania znakowanego mannanu na ich błonie. Obserwacje, że nieistotne komórki blastyczne nie wiązały [3H] mannanu i że specyficzne dla mannanu komórki blastyczne nie wiązały się z trytowanym pneumokokowym polisacharydem SIII, wskazują na specyficzność wiązania mannanu. ...

Opróżnianie żołądka i wydzielanie w zespole Zollingera-Ellisona.

Opróżnianie żołądka i wydzielanie, a także objętość i skład soku żołądkowego określono jednocześnie u trzech pacjentów z zespołem Zollingera-Ellisona iu siedmiu zdrowych osób. Nadciśnienie w żołądku obserwowano u pacjentów z zespołem Zollingera-Ellisona iu osób zdrowych otrzymujących pentagastrynę. W przeciwieństwie do tego frakcja zawartości żołądka opróżniana na minutę (ułamkowa stopa opróżniania) była zwiększona u pacjentów Zollingera-Ellisona i niezmieniona lub zmniejszona u zdrowych osób otrzymujących pentagastrynę. Zwiększona ułamkowa stop...

Ludzki czynnik stymulujący kolonie granulocytowo-makrofagowe indukuje ekspresję genu czynnika martwicy nowotworu przez linię komórkową U937 i normalne ludzkie monocyty.

Czynnik stymulujący wzrost kolonii granulocytów i makrofagów (GM-CSF) wywiera głęboki wpływ na proliferację, różnicowanie i funkcję efektorową komórek linii mieloidalnej. W przeciwieństwie do jego wpływu stymulującego wzrost na normalne szpikowate komórki progenitorowe, stwierdziliśmy, że GM-CSF nieoczekiwanie hamuje wzrost kolonii komórek U937 w hodowli agarowej. Ponadto stwierdzono, że pożywka uwarunkowana przez rekombinowane komórki U937 traktowane GM-CSF (rGM-CSF) wywiera hamujący wpływ na dalszy wzrost kolonii U937, co częściowo wynikało z obecności czynnika...

Zależność między fenotypem apolipoproteiny (a), stężeniem lipoproteiny (a) w osoczu i funkcją receptora lipoprotein o małej gęstości w rodzinnej hipercholesterolemii z powodu mutacji pro664 ---- leu w genie receptora LDL.

W dużej grupie 66 osób 22 zidentyfikowano jako heterozygotyczne, a 3 jako homozygotyczne pod względem mutacji (pro664 ---- leu) w genie receptora LDL, co prowadzi do rodzinnej hipercholesterolemii (FH). Wszystkie heterozygoty miały podwyższony poziom całkowitego cholesterolu w osoczu i cholesterolu lipoprotein niskiej gęstości, ale były wyjątkowo wolne od przedwczesnej choroby wieńcowej. Oznaczenie stężenia apolipoproteiny (a) (apo (a)) i lipoproteiny (a) (Lp (a)) w osoczu wykazało, że w wielu przypadkach u osób z różnymi fenotypami apo (a) nie było różnicy w Lp w osocz...

Śmierci komórkowej śledziony limfocytów B jest zapobiegane przez uwalnianie tlenku azotu poprzez mechanizmy wiążące się z utrzymującymi się poziomami Bcl-2.

Inkubacja dojrzałych limfocytów B hodowanych ex vivo w obecności tlenku azotu lub substancji będących donorami tlenku azotu opóźnia zaprogramowaną śmierć komórki, co określa się przez pojawienie się drabiny DNA w elektroforezie w żelu agarozowym lub przez analizę metodą cytometrii przepływowej DNA. Tlenek azotu również ratuje limfocyty B przed apoptozą indukowaną antygenem, ale nie zapewnia sygnału kostymulującego, który przekształca sygnał wywołany przez antygen w odpowiedź proliferacyjną. Ochronne działanie tlenku azotu przed programowaną śmiercią komórk...

Immunizacja antygenem powierzchniowym merozoitu Plasmodium falciparum indukuje częściową odporność u małp.

Małpy Saimiri immunizowane polipeptydem merozoitu Plasmodium falciparum o masie cząsteczkowej 41 kD są odporne na infekcję prowokowaną krwią, która indukuje piorunującą infekcję u kontrolnych małp. Surowice immunizowanych małp reagowały, jak pokazano techniką pośredniej immunofluorescencji, z wierzchołkową częścią merozoitów z pięciu izolatów lub klonów P. falciparum. To, czy immunogen był rozpuszczony w niejonowym detergencie (NP-40), czy w dodecylosiarczanie sodu (SDS) miało znaczący wpływ na poziom ochrony u immunizowanych małp. Tak więc małpy immunizowane ...

Charakterystyka wirusa powodującego przejściowy kryzys aplastyczny.

Przejściowy kryzys aplastyczny u dzieci z wrodzonymi anemiami hemolitycznymi powiązano epidemiologicznie z zakażeniem wirusem podobnym do parwowirusa (SPLV). Wirus znajduje się we krwi we wczesnych stadiach kryzysu, a surowica zawierająca SPLV hamuje tworzenie kolonii erytrocytów in vitro. Po sedymentacji surowic zawierających wirusa przez gradient gęstości sacharozy, aktywność hamowania kolonii występuje w frakcji cząstek stałych i oddziela się od immunoglobulin w surowicy. Żadna aktywność hamująca nie może być odzyskana z surowic w fazie rekonwalescencji po podobnych ...

Wzmocnienie wydzielania zewnątrzwydzielniczego indukowanego cholecystokininą zarówno przez egzogenną, jak i endogenną insulinę w izolowanych i perfundowanych trzustkach szczurzych.

Stosując wyizolowany perfundowany preparat trzustki na szczurach, badano wzajemne zależności między częściami trzustki wewnątrzwydzielniczej i zewnątrzwydzielniczej. Dodanie egzogennej szczurzej insuliny (1-20 mU / ml) do perfundującego roztworu potwierdziło działanie cholecystokininy (CCK) (1 mU / ml), aby zwiększyć przepływ soku trzustkowego i uwolnienie enzymu, amylazy. Podniesienie stężenia glukozy w perfundowanym roztworze z 2,5 do 17,5 mM zarówno zwiększyło endogenne uwalnianie insuliny, jak i potwierdziło wywoływaną przez CCK zewnątrzwydzielniczą odpowiedź wy...

Tłumaczenie i stabilność mRNA ludzkiej globiny w oocytach Xenopus.

Ludzki matrycowy RNA (mRNA) przygotowany z komórek erytroidalnych pacjentów z niedokrwistością sierpowatych komórek został przetłumaczony na oocyty Xenopus laevis. Dodanie heminy do wstrzykniętego mRNA powoduje wzrost całkowitej syntezy globiny i stosunek alfa do syntezy beta-globiny (stosunek alfa / beta) do zbliżenia się do jedności. Aby określić wpływ długości segmentu poli (A) na stabilność mRNA ludzkiej globiny, mRNA 10S globiny frakcjonowano na frakcje poli (A) -pochodne przez chromatografię kolumnową oligo (dT) -celelozy. Gdy oocyty są wstrzykiwane w każdą z t...

Wydzielanie lipazy lipoproteinowej przez ludzkie makrofagi pochodzące z monocytów.

Ludzkie makrofagi pochodzące z monocytów w hodowli wytwarzały lipazę lipoproteinową. Chociaż świeżo wyizolowane monocyty krwi nie wydzielały znacznej aktywności lipazy, 1 d w hodowli była wystarczająca do wywołania mierzalnej produkcji enzymu. W ciągu 3 tygodni w hodowli maksymalna aktywność została osiągnięta po 7 dniach. Przez cały czas pożywka hodowlana zawierała więcej aktywności enzymatycznej niż eluat surowicy-heparyny lub ekstrakt detergentowy warstwy komórkowej. Aktywność lipazy stymulowano surowicą i hamowano przez wstępną inkubację z surowicą odpor...

Rodzinna kardiomiopatia przerostowa jest genetycznie heterogenną chorobą.

Wykazujemy, że rodzinna przerostowa kardiomiopatia (FHC), autosomalne dominujące zaburzenie mięśnia sercowego, jest genetycznie heterogenną chorobą. Miejsce odpowiedzialne za FHC u członków jednego dużego pokolenia zostało niedawno zmapowane na chromosomie 14q11-12 (FHC-1). Scharakteryzowaliśmy trzy dodatkowe niespokrewnione rodziny, w których gen FHC oddziela się jako autosomalna dominująca cecha, aby określić, czy te loci chorobowe są również mapowane na FHC-1. Wszyscy członkowie rodziny zostali przebadani klinicznie na podstawie badania fizykalnego, elektrokardiogramu...

Krążące kompleksy immunologiczne i czynnik reumatoidalny immunoglobuliny A u pacjentów z mezangialną immunoglobuliną A nefropatii.

Krążące kompleksy immunologiczne (CIC) zawierające IgA i C3 były podwyższone u 48% pacjentów z nefropatią IgA; IgA1 była dominującą podklasą. IgE1-IgG CIC wykryto w 44%, IgA2-IgG CIC w 7%, a IgM-IgA1 CIC u 16% pacjentów. Nie wykryto CIC IgM-IgA2. Ultrawirowanie z gradientem sacharozy wykazało, że IgG-IgA1 CIC miały przeważnie średnicę pośrednią (13-19S), podczas gdy IgA1-C3 CIC osiadały od 11S do 19S. Przy kwaśnym pH wyizolowany CIC ujawnił obecność znacznych ilości 7S IgA. Jedna trzecia pacjentów miała podwyższony poziom czynnika reumatoidalnego w surowicy IgA...

Fizjologiczne zróżnicowanie między opóźnioną i bezpośrednią nadwrażliwością

Przeprowadzono badania dotyczące przemieszczania różnych makrocząsteczek do przestrzeni opłucnej świnek morskich i wyprowadzania z niej w trakcie opóźnionej reakcji nadwrażliwości na oczyszczoną pochodną białkową (PPD) oraz pasywnie przenoszonej natychmiastowej reakcji nadwrażliwości na owalbuminę. Podczas gdy natychmiastowa reakcja nadwrażliwości przejściowo zmienia przepuszczalność naczyń, o czym świadczy zwiększony ruch makrocząsteczek w klatce piersiowej, opóźniona reakcja nadwrażliwości charakteryzuje się zmniejszoną zdolnością do resorpcji makromoleku...

Rasy i różnice płci w erytrocytach Na +, K + i Na + -K + -adenozyny trifosfatazy.

Kilka raportów wskazuje, że erytrocyty (RBC) od czarnych i mężczyzn mają wyższe stężenia sodu niż te od białych i kobiet. Jednym z możliwych mechanizmów wyjaśnienia tego odkrycia jest różnica w aktywności Na + -K + -ATPazy. Aby zbadać tę możliwość, zbadaliśmy kinetykę Na + i K + stężenia RBC Na + -K + -ATPazy i RBC Na + i K + u 37 zdrowych czarnych i białych, zarówno mężczyzn, jak i kobiet. Maksymalne wartości początkowej prędkości reakcji (Vmax) dla RBC Na + -K + -ATPazy były niższe u czarnych i mężczyzn w porównaniu z białkami i kobietami. Wyższe po...

Zaawansowane produkty końcowe glikozylacji blokują antyproliferacyjny efekt tlenku azotu. Rola w powikłaniach naczyniowych i nerkowych cukrzycy.

Zaawansowane produkty końcowe glikozylacji (AGE) gromadzą się na długowiecznych białkach tkankowych, takich jak kolagen błony podstawnej i są związane z wieloma długotrwałymi powikłaniami cukrzycy. Produkty te pochodzą z pochodnej Schiffa i produktów Amadori bazujących na glukozie, ale przechodzą szereg złożonych reakcji rearanżacji, tworząc ostatecznie związane z białkami, fluorescencyjne heterocykle. AGE mogą reagować i chemicznie inaktywować tlenek azotu (NO), silny czynnik rozszerzający naczynia krwionośne śródbłonka i czynnik antyproliferacyjny. Ponieważ p...

Powszechny neoepitop powstaje, gdy reaktywne centrum inhibitora C1 jest rozszczepiane przez kallikreinę osocza, aktywowany fragment czynnika XII, esterazę C1 lub elastazę neutrofilową.

Reaktywne centrum inhibitora C1, inhibitor proteazy osocza należącego do nadrodziny serpiny, znajduje się w pętli peptydowej, która jest wysoce podatna na cięcie proteolityczne. W przypadku kalikreiny osoczowej, C1s i beta-czynnika XIIa, rozszczepienie zachodzi w reszcie P1 miejsca reakcji (Arg444); z elastazą neutrofilową odbywa się w pobliżu P1, prawdopodobnie przy reszcie P3 (Val442). Po tych rozszczepieniach inhibitor C1 jest inaktywowany, a jego konformacja jest modyfikowana. Ponadto, in vivo, rozszczepiony inhibitor C1 jest usuwany ze strumienia krwi szybciej niż nienaruszo...

Zmniejszono krążące komórki pochodzące z grasicy za pomocą receptorów dla części Fc immunoglobuliny G w toczniu rumieniowatym układowym.

Komórki pochodzące z grasicy z receptorami dla części Fc immunoglobuliny G (limfocyty Fcgamma +) okazały się ostatnio mieć funkcję supresorową, funkcję zmniejszoną w układowym toczniu rumieniowatym (SLE). Komórki T Fcgamma + zostały znacząco zmniejszone u 21 nieleczonych pacjentów z SLE, szczególnie u 7 pacjentów z aktywną chorobą. Większość komórek T Fcgamma + rozdzielono subpopulacją komórek T o niskim powinowactwie do erytrocytów owcy. Zmniejszenie tej subpopulacji zależało od zmniejszenia liczby komórek Fcgamma +. Komórki nie-T z receptorami Fcgamma równi...

Zmieniona ekspresja receptora C3b erytrocytu, kompleksy immunologiczne i aktywacja dopełniacza u homoseksualnych mężczyzn w różnych grupach ryzyka dla nabytego zespołu niedoboru odporności.

Badaliśmy poziomy receptorów erytrocytarnych C3b (E-CR1) i skorelowaliśmy je z poziomem krążących kompleksów immunologicznych (CIC) i aktywacją dopełniacza u pacjentów z ryzykiem zespołu nabytego niedoboru odporności (AIDS). Znaczącą redukcję stwierdzono u pacjentów z AIDS (185 +/- 93 CR1 / komórkę), zespołem związanym z AIDS i uogólnioną limfadenopatią, podczas gdy zdrowi homoseksualiści lub normalni kontrolerzy mieli 434 +/- 193 i 509 +/- 140 CR1 / komórka, odpowiednio (P mniej niż 0,001). Badania rodzinne wskazują, że ta wada została nabyta. Redukcja E-CR1 by...

Tłumienie wytwarzania androgenów przez hormon uwalniający hormon D-tryptofan-6-luteinizujący u człowieka.

Czterech mężczyzn transseksualnych otrzymało superwytentowy analog hormonu uwalniającego hormon luteinizujący (LHRH), D-tryptofan-6-LHRH w dziennych dawkach 100 mikrogramów przez 3 - 6 miesięcy. Zaobserwowano zmniejszenie wzrostu brody, trądziku i siły erekcji; ten ostatni został obiektywnie udokumentowany nagraniami nocnych epizodów tumescencji prącia. Poziom testosteronu i dihydrotestosteronu w osoczu spadł do wartości kastracyjnych; poziomy podstawowej prolaktyny i hormonu luteinizującego wykazywały niewielki spadek, podczas gdy hormon luteinizujący ulegający wyraźnemu...

Protoporfiria erytropoetyczna. Fotoaktywacja układu dopełniacza.

Układ dopełniacza analizowano u 14 bezobjawowych pacjentów z protoporfirią erytropoetyczną. W większości badanych surowic poziomy składników dopełniacza C1, C4, C2 i C3 mieściły się w zakresie prawidłowym. Po napromieniowaniu próbek surowicy in vitro promieniowaniem ultrafioletowym (330-460 nm) zaobserwowano wyraźny spadek całkowitej aktywności hemolitycznej, któremu towarzyszyła redukcja poziomów C1, C4, C2 i C3. Utratę całkowitej aktywności hemolitycznej można bezpośrednio powiązać z poziomami protoporfiryny (PP), a podobne zmiany można uzyskać w normalnej su...

Wielokrotne delecje mitochondrialnego DNA w kilku tkankach pacjenta z ciężką upośledzoną depresją i rodzinną postępującą zewnętrzną oftalmoplegią.

Wielokrotne delecje mitochondrialnego DNA (mtDNA) odnotowano ostatnio w rodzinnej postępującej zewnętrznej oftalmoplegii (PEO), w przypadku postępującej encefalomiopatii oraz w odziedziczonej nawracającej mioglobinurii. Dziedziczenie rodzinnej PEO było autosomalne dominujące, co wskazuje, że mutacja w nieznanym genie jądrowym prowadzi do kilku delecji mtDNA o różnej wielkości u tych pacjentów. Zgłaszamy pacjenta z autosomalnym dominującym PEO, którego głównym objawem klinicznym była jednak ciężka upośledzona depresja. Analizy morfologiczne próbek tkanek pochodzących...

Monoklonalne przeciwciała przeciwko ludzkiej błonowej erytrocytowej pompie adenozynowo-trójfosfatowej Ca ++ - Mg ++ rozpoznają epitop w boczno-bocznej błonie komórek nerkowych nerki ludzkiej nerki.

Ludzkie tkanki transportujące wapń badano w celu określenia, czy zawierały one białko podobne do pompy adenozyno-trifosfatazowej Ca ++ - Mg ++ ATP-azy ludzkiej błony erytrocytów. Tkanki poddano obróbce w celu barwienia immunoperoksydazowego przy użyciu przeciwciał monoklonalnych przeciwko oczyszczonej ATP-azy Ca ++ - Mg ++. W nerkach ludzkich specyficzne zabarwienie stwierdzono jedynie wzdłuż boczno-bocznej błony dystalnych, zwichniętych kanalików. Kłębuszki i inne segmenty nefronu nie plamiły. Łatwo obserwowano barwienie erytrocytów w ludzkiej śledzionie. Ludzkie jelit...

Zmienione właściwości kinetyczne kompleksu dehydrogenazy alfa-ketokwasów o rozgałęzionym łańcuchu w wyniku mutacji podjednostki beta rozgałęzionego alfa-ketokwasowej dekarboksylazy (E1) w limfoblastoidalnych komórkach pochodzących od pacjentów z klon

Rozgałęzione łańcuchy dehydrogenazy alfa-ketokwasów (BCKDH) kompleksów limfoblastoidalnych linii komórkowych pochodzących od pacjentów z klasycznymi fenotypami choroby syropu klonowego (MSUD) badano pod kątem ich funkcji katalitycznych i analizowano przez immunoblotting, stosując oczyszczone przez powinowactwo przeciwciało BCKDH przeciw bydłu . Badania kinetyczne na trzech liniach komórkowych pochodzących od pacjentów z fenotypem klasycznym wykazały kinetykę sigmoidalną lub bliską sigmoidalną dla ogólnej aktywności BCKDH i niedoboru aktywności składnika E1. Badanie ...

Identyfikacja 16 600-daltonowego białka błony na nietypowym Haemophilus influenzae jako celu dla bakteriobójczego przeciwciała surowicy ludzkiej.

Białko błony zewnętrznej 16 600-D jest obecne we wszystkich szczepach Haemophilus influenzae, a przeciwciała przeciwko temu białku są obecne w ludzkiej surowicy. Badanie to zaprojektowano w celu oceny roli tego białka błony zewnętrznej (P6) w nietypowych H. influenzae jako celu dla bakteriobójczego przeciwciała surowicy ludzkiej. P6 wyizolowano i połączono z kolumną powinowactwa. Zubażanie normalnej ludzkiej surowicy przeciwciał przeciwko P6 za pomocą chromatografii powinowactwa skutkowało zmniejszoną aktywnością bakteriobójczą tej surowicy dla nietypowych H. influenz...

Charakterystyka wariantu prekallikreiny, prekalikreiny Long Beach, z rodziny o mieszanym reagującym krzyżowo materiale dodatnim i reagującym krzyżowo z materiałem ujemnym niedoborem prekallikryny.

Przeprowadzono badania prekalikreiny w osoczu w rodzinie z niedoborem prekalikreiny. Troje dzieci nie miało aktywności krzepnięcia, ale około 35% poziomów antygenu, a matka i pięcioro dzieci miało dwukrotnie więcej antygenu prekallikreiny jako aktywność krzepnięcia, co sugeruje obecność dysfunkcyjnej cząsteczki. Niefunkcjonalną postać wariantową prekalikreiny oczyszczono, która nie zawierała aktywności krzepnięcia prekallikreiny. Wariant i normalne cząsteczki były zarówno 80 000 mol wag, immunologicznie nierozróżnialne i skompleksowane podobnie z kininogenem o wyso...

Klinicznie nieczynne guzy przysadki są pochodzenia monoklonalnego.

Klinicznie nieczynne gruczolaki przysadki są łagodnymi nowotworami zawierającymi około 25-30% guzów przysadki. Niewiele wiadomo na temat patogenezy nowotworów przysadki mózgowej. Analiza klonów pozwala dokonać ważnego rozróżnienia między poliklonalną proliferacją w odpowiedzi na czynnik stymulujący a monoklonalną ekspansją genetycznie nieprawidłowej komórki. Zbadaliśmy klonalne pochodzenie guzów przysadki za pomocą polimorfizmów długości fragmentów restrykcyjnych połączonych z X przy genach kinazy fosfoglicerydowej i hipoksantynowo-fosforybozylo-transferazowej. ...

Interleukina-10 moduluje ekspresję genów kolagenu typu I i metaloproteazy macierzy w hodowanych fibroblastach ludzkiej skóry.

IL-10, pierwotnie wyizolowana z komórek T pomocniczych myszy, jest cytokiną o funkcjach regulacyjnych na wielu interleukinach. W tym badaniu pokazujemy, że rekombinowana ludzka IL-10 wpływa na ekspresję kilku genów zaangażowanych w syntezę macierzy pozakomórkowej i przebudowę w ludzkich kulturach fibroblastów skóry. Jak oceniano w analizach Northern blot, ekspresja genów kolagenu typu I była obniżona, podczas gdy ekspresja genu kolagenazy i genu stromelizyny była znacznie wzmocniona przez IL-10. Nie stwierdzono wpływu na tkankowy inhibitor metaloproteaz poziomów mRNA. Prze...

Kinetyka neutrofili u psa.

Wytwarzanie neutrofili u psów oszacowano na podstawie liczby neutrofilów postmitotycznych w szpiku i czasu przejścia impulsu [3H] -tymidyny. Liczba neutrofilów z postmitotią uzyskano z pomiaru erytroidalnego obrotu żelaza i liczby erytrocytów w przekrojach szpiku kostnego. Średnia wartość neutrofilów postmitotycznych szpiku u psów wynosiła 5,61 plus minus 0,56 razy 10-9 komórek / kg. Średni czas przejścia tych neutrofili obliczono na 82,1 h. Na podstawie tych danych obliczono produkcję szpiku z 1,65-krotnością 10-9 neutrofili / kg / dzień. Obrót krążących krwinek bia...

Rodzinne ginekomastia ze zwiększonym pozamiejscowym aromatyzowaniem węglowych 19 steroidów w osoczu.

Ocenialiśmy rodzinę, w której ginekomastia występowała u pięciu mężczyzn w dwóch pokoleniach. U każdego chorego ginekomastii i dojrzewania płciowego mężczyzn rozpoczął się w młodym wieku. Stosunek stężenia estradiolu-17 beta w osoczu do stężenia testosteronu w osoczu był podwyższony u każdego chorego osobnika. W przypadku trzech rodzeństwa z ginekomastią, stała transferu konwersji androstendionu do estronu (tj. Frakcja plazmy androstenedionu, która została przekształcona w estron, jak zmierzono w moczu) była 10 razy większa niż u osób zdrowych. Stała przen...

Interleukina 1 pobudza limfocyty T do wytwarzania czynnika stymulującego wzrost kolonii granulocytów i monocytów.

Uważa się, że limfocyty T współdziałają z monocytami w celu wytworzenia czynników stymulujących kolonie (CSF). Jednak niewiele wiadomo o sygnałach, w których pośredniczą monocyty prowadzące do sekrecji CSF przez limfocyty T, chociaż sugerowano, że rozpuszczalne produkty monocytów. Zastosowaliśmy przeciwciało monoklonalne anty-T3B kowalencyjnie sprzężone z kulkami Sepharose 4B aktywowanymi CnBr, aby wykazać, że multimeryczna ligacja receptora antygenu komórek T prowadzi do receptywności limfocytów T wobec interleukiny 1 (IL-1), na co wskazuje wytwarzanie CSF limfocy...

Retargetowanie komórek przez bispecyficzne przeciwciała monoklonalne. Dowód pominięcia wrażliwości śródpiersia na lizę komórek w czerniaku ludzkim.

Nieleczność wewnątrzmaciczna pod względem podatności na lizę cytotoksycznych limfocytów T (CTL) stanowi główną przeszkodę w immunoterapii adoptywnej nowotworów. Aby pokonać heterogenność obserwowaną pod względem podatności komórek docelowych na lizę komórkową, w tym badaniu wykorzystano dwa oczyszczone bispecyficzne przeciwciała monoklonalne (bsmAbs), które rozpoznają cząsteczki ekspresjonowane przez cytotoksyczne komórki efektorowe (cząsteczki receptora CD3 i IgG Fc), jak również jako jeden wysokocząsteczkowy antygen związany z czerniakiem (HMW-MAA). Zdolno...

Klonowanie i ekspresja zmutowanej mutacji metylomalonylo-koenzymu A o zmienionym powinowactwie do kobalaminy, które powoduje kwaśny zanik metylometylowy.

Wyraźne genotypowe i fenotypowe postacie niedoboru apoenzymu zmutowanego metylmalonylo-CoA (MCM) można wyznaczyć przez analizę biochemiczną zmutowanych fibroblastów. Jedna forma, oznaczona mut-, wyraża fenotyp, w którym resztkowa aktywność enzymu jest widoczna w hodowanych komórkach eksponowanych na wysokie stężenia hydroksykobalaminy. Opisujemy klonowanie cDNA MCM z komórek wykazujących mutację fenotypową i charakterystykę zmutowanego produktu genu poddanego nadmiernej ekspresji w pierwotnych ludzkich fibroblastach mutowanych i Saccharomyces cerevisiae. Zaobserwowano trzy...

Wadliwy wzrost in vitro hemopoetycznych komórek progenitorowych w zespole nabytego niedoboru odporności.

Oprócz zaburzeń immunologicznych, nieprawidłowości hematologiczne zgłaszano u większości pacjentów z zespołem nabytego niedoboru odporności (AIDS). W tym badaniu oceniano 15 pacjentów z AIDS lub zespołem związanym z AIDS (ARC) pod kątem wzrostu in vitro hemopoetycznych komórek progenitorowych. U wszystkich pacjentów stwierdzono istotne zmniejszenie wzrostu (średnia ? SEM) jednostki tworzącej kolonie - granulocytów, erytrocytów, makrofagów, (megakariocytów) (CFU-GEM) (1,2 +/- 0,3), jednostek erytroidalnych tworzących pęk ( BFU-E) (17 +/- 10), megakariocyt CFU (CFU-Mk)...

Chromogranina A w prawidłowych i złośliwych tkankach ludzkich.

Wykorzystano rekombinowaną sondę cDNA do ludzkiej chromograniny A do pomiaru ekspresji mRNA kodowanego przez ten gen w różnych prawidłowych tkankach ludzkich i próbkach nowotworowych przy użyciu analizy hybrydyzacji Northern i hybrydyzacji in situ. Z kilkoma wyjątkami ekspresja mRNA chromograniny A wydaje się być ograniczona do prawidłowych tkanek i nowotworów linii neuroendokrynnej. Jednakże wykryliśmy ekspresję mRNA tego genu w 1 z 14 linii komórkowych i 2 z 13 próbek guza gruczolakoraka okrężnicy. Stwierdzenie ekspresji chromograniny A w niektórych raku okrężnicy su...

Amplifikacja zmienionych samoreaktywnych odpowiedzi limfocytów T cytopla-tycznych przez klonowane, allospecyficzne ludzkie komórki Th.

Badano wpływ klonowanej allospecyficznej ludzkiej komórki Th, zwanej 86, na wytwarzanie in vitro zmienionych autoreaktywnych cytolitycznych limfocytów T (CTL). Wykorzystując indukcję zmienionej haptenowo autoreaktywnej CTL jako modelu dla odporności komórkowej zależnej od guza lub nowotworu, ustaliliśmy, że obecność niewielkiej liczby komórek klonu 86 znacznie zwiększyła wytwarzanie zmodyfikowanych haptenowo autoreaktywnych CTL. Komórki zabójcze indukowane należą do podgrupy CD4-, CD8 +, są specyficzne dla autologicznych stymulowanych haptenem komórek obecnych w hodowli...

Podzbiór naturalnych komórek zabójczych jest indukowany przez kompleksy immunologiczne w celu wyświetlenia receptorów Fc dla IgE i IgA i wykazuje funkcję regulacji izotypowej.

Badano ekspresję receptorów Fc dla IgE (FcER) lub IgA (FcAR) na oczyszczonych komórkach NK (NK). Nie wykryto FcER + i kilku komórek NK FcAR + na świeżo rozdzielonych komórkach NK (NKH-1 +) od zdrowych dawców. Inkubacja komórek NK kompleksami immunologicznymi IgE-anty-IgE lub kompleksami immunologicznymi IgA-anty-IgA indukowała odpowiednio do 10 i 20% komórek FcER + lub FcAR +. Te FcR indukowano na CD3-, ale nie na komórkach CD3 + NKH-1 +. W przeciwieństwie do tego, komórki NK od pacjentów z różnymi dysgammaglobulinemiami nie mogą być indukowane do ekspresji FcER lub FcAR ...

Lokalizacja miejsca rekombinacji w tworzeniu genu globiny Lepore Boston.

Miejsce skrzyżowania sekwencji genów delta i beta-globiny, w wyniku których powstało geny globiny Lepore Boston, zlokalizowano na poziomie DNA. Sondy specyficzne do wykrywania sekwencji interweniujących (IVS) genów delta i beta-globiny zastosowano do mapowania pochodzenia komórkowych fragmentów DNA pacjenta homozygotycznego względem hemoglobiny Lepore Boston. Analiza endonukleazy restrykcyjna i hybrydyzacja tego DNA z sondami swoistymi dla IVS pokazują, że większość, jeśli nie wszystkie, dużych sekwencji interweniujących (IVS 2) w Lepore DNA pochodzą z genu beta-globiny IV...

Nieprawidłowość lipoproteinowa w chorobie Tangier: ilościowe oznaczanie apoprotein.

W tym badaniu ustaliliśmy na podstawie testu radioimmunologicznego i podwójnej immunoelektroforezy całkowite ilości i rozkłady apoprotein A u trzech dorosłych pacjentów dotkniętych chorobą Tangier (dziedziczny niedobór alfa-lipoprotein). W porównaniu z prawidłowym osoczem, całkowite ilości apoprotein AI i A-II w osoczu Tangeru określono jako mniejsze niż 1% i 5-7%, odpowiednio. U pacjentów z Tangeru około 90% AI apoproteiny osiadło, gdy ultrawirowanie osocza przeprowadzono przy gęstości 1,21 g / ml KBr. Przeciwnie, ponad 95% apoproteiny A-II unosiło się w tych warunka...

Składnik dopełniacza C1q wzmaga inwazję ludzkich jednojądrzastych fagocytów i fibroblastów za pomocą trypomastigoty Trypanosoma cruzi.

Internalizacja i infekcyjność Trypanosoma cruzi trypomastigota przez makrofagi jest wzmocniona przez wcześniejsze leczenie pasożytów normalną ludzką surowicą. Surowica do ogrzewania lub usuwanie C1q z surowicy znosi wzmocnienie, ale wzmocnienie przywiązania i infekcyjności jest przywracane przez dodanie oczyszczonego C1q do źródła surowicy. Chociaż zarówno nieinfekcyjne epimastigoty (Epi), jak i tryptomigotyty w tkankach kręgowców (TCT) wiążą C1q w nasycalny sposób w 4 ° C, internalizacja przez monocyty i makrofagi TCT, ale nie zawierająca Epi Clq, jest zwiększona w ...

Wyrażanie genu interleukiny 1 zależnej od cyklu komórkowego przez hodowane kłębkowe komórki mezangialne.

Glomerularna mezangialna komórka (MC) - pochodna IL-1 może być ważnym czynnikiem w rozwoju hiperkomórkowości i stwardnienia charakterystycznych dla wielu postaci kłębuszkowego zapalenia nerek. Aby zdefiniować regulację syntezy IL-1 przez ludzkie MC, przeprowadzono analizę Northern blot przy użyciu specyficznych sond do monocytowego IL-1 alfa i beta mRNA. Proliferujący MC ulegał ekspresji mRNA zarówno dla IL-1 alfa, jak i beta, podczas gdy nieproliferujący MC nie zawierał wykrywalnego mRNA IL-1. Zsynchronizowany MC eksprymował mRNA IL-1 alfa i beta w ciągu 2 godzin stymula...

Kontrola metabolizmu hemu za pomocą syntetycznych metaloporfiryn.

Badania z użyciem syntetycznych kompleksów metal-porfiryna, w których centralny atom żelaza w hemie zastąpiono innymi pierwiastkami, wskazują, że te analogi hemu, które nie mogą zostać enzymatycznie degradowane do pigmentów żółciowych, mają nowe właściwości biologiczne, które mogą mieć znaczną wartość kliniczną, jak również eksperymentalną. Badania takie ujawniły ważną rolę, jaką centralny atom metalu odgrywa w określaniu fizjologicznych i farmakologicznych właściwości kompleksów metal-porfiryna; i pokazali, że forma, w której zwierzęta i ludzie są ...

Przemijająca supresja hemopoeza klonalna związana z ciążą u pacjenta z zaburzeniem mieloproliferacyjnym.

Wykorzystaliśmy analizę polimorfizmu długości fragmentów restrykcyjnych w celu zbadania klonalnego zaangażowania komórek krwi u kobiety z chorobą mieloproliferacyjną, której początkowo wysoka liczba płytek krwi (940 000 / mikrolitr) spontanicznie spadła podczas normalnej ciąży, ale następnie szybko powróciła do tego samego wysokiego poziomu po dostawa jej dziecka. Analiza jej progenitorów erytroidalnych wykazała obecność prekursorów niezależnych od erytropoetyny przed, w trakcie i po jej ciąży, zgodnie z diagnozą choroby mieloproliferacyjnej i utrzymaniem się nie...